一、溶解酶為何出現(xiàn)酶活性低現(xiàn)象?
? ? 1)運(yùn)輸過(guò)程中酶已失活;
? ? 2)沒(méi)有充分搖勻;
? ? 3)配制過(guò)程中試劑、蒸餾水、移液管被污染或沒(méi)有洗凈;
? ? 4)操作不當(dāng),導(dǎo)致酶失活;
? ? 5)培養(yǎng)時(shí)間較短;
? ? 6)培養(yǎng)溫度較低;
? ? 7)配置好的試劑保存溫度過(guò)高,使酶失活。
? ? 二、食品安全測(cè)試過(guò)程中需要注意哪些問(wèn)題?
? ? 1)在檢測(cè)過(guò)程中反應(yīng)瓶、微量移液器、移液管等要洗干凈;特別是用完后立即清洗,放在無(wú)污染的地方晾干(如濾紙上、移液管架上等);
? ? 2)不同試劑使用不同的器具,堅(jiān)持器具專用,并貼上專用標(biāo)簽;
? ? 3)酶、顯色劑、底物的加入量要準(zhǔn)確,加后要搖勻;
? ? 4)用手抓比色皿的磨砂面,放進(jìn)儀器比色槽時(shí),應(yīng)將透光面對(duì)應(yīng)光路方向,讓光路通過(guò)比色皿的透光面;
? ? 5)操作要盡量快。因?yàn)槊敢种坡蕶z測(cè)的關(guān)鍵就是抑制率與反應(yīng)時(shí)間的關(guān)系,對(duì)照測(cè)量和樣品測(cè)量操作時(shí)間不一致,也會(huì)造成檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確;
? ? 6)加入酶試劑以前一定要把培養(yǎng)池溫度加熱到37℃,以保證加完酶液和顯色劑后能立即把反映瓶放入培養(yǎng)池,切記不能加完試劑后再等升溫;
? ? 7)在使用移液槍吸取溶液時(shí),按壓要適度,切忌一下按到底,并且吸頭要及時(shí)清洗。
? ? 三、農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀其他注意事項(xiàng):
? ? 1、磷酸鹽緩沖液的配置一定要用蒸餾水或純凈水或礦泉水,否則影響準(zhǔn)確性;
? ? 2、酶試劑及底物要在0~5℃溫度條件下保存,以確保酶的活性,因此,應(yīng)在冰箱中保存,但不能凍至結(jié)冰;
? ? 3、試劑從試劑瓶吸出后,不能再放回瓶中,堅(jiān)持只吸不進(jìn)的原則,防止試劑污染;
? ? 4、樣品測(cè)試的最后一道程序,即加底物后,應(yīng)馬上搖勻,放入測(cè)定儀,否則影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。經(jīng)實(shí)踐,在菠菜樣品的測(cè)試中,立刻放入的抑制率為21.4%,1分鐘后放入的51.7%,可見(jiàn),加試劑后放入時(shí)間的長(zhǎng)短可影響其準(zhǔn)確性;
? ? 5、韭菜、芹菜、蒜、蔥及茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。因此.,處理這類樣品時(shí),可采取整株蔬菜浸出提取液的方法(不要搞爛樣品)。對(duì)葉綠素含量較高的蔬菜,也可采取類似方法;
? ? 6、生化檢測(cè)法只是定性檢測(cè)法,只能檢測(cè)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留,不適用于其它類型農(nóng)藥的檢測(cè)。